第204章 孙教授：打不过能加入吗？（2/2）
说的跟江河说的一模一样。
王晓晴也有些意外地看向杨煦：“杨主任，你对基础分子实验也这么有研究”
杨煦故作谦虚：“医学是不分家的嘛，临床和基础本来就是相辅相成的，再说了，你们这套方案，为了补足二次抽提带来的浓度流失，肯定在沉淀前加了东西吧”
王晓晴再度惊讶，乖巧点头：“確实。”
“5微升，5g/i的糖原，糖原作为共沉淀剂，不影响下游的pcr扩增，还能让微量的rna在管底形成肉眼可见的沉淀团块，我说的对吧”
“对的对的。”
王晓晴觉得杨煦有点厉害了，稍有些崇拜。
杨煦心里乐开了花，脸上云淡风轻。
他转过头，看了江河一眼，挑了挑眉毛。
江河默默地剥开一个橘子，把目光偏向窗外，看天。
想装就装吧，谁让你是我老师呢。
休息时间结束。
实验重新运转。
接下来的环节是沉淀后的无水乙醇洗涤。
王晓晴准备亲自操作移液枪。
杨煦在她旁边轻声提醒，美其名曰指导：“王教授，样本沉淀物很小，洗涤的时候，枪头最好贴著管壁对侧下去。”
“我知道。”
“吸的时候慢一点，拇指控制好二挡的回弹力度。”
“杨主任，你挡著我光了。”
“哦哦，抱歉，习惯性盯紧细节。”
就在这时，许久未见的孙长明教授来串门了。
“哎哟，都在忙呢”
他今日看著心情不错，背著手，春风得意的。
目光扫过全场，看见杨煦也在，笑意更深：“老杨也在啊怎么，今天医院不忙啊”
杨煦脸上的笑容一下就消失了，道：“来看看项目进度，你来干什么”
“我我是来分享学术经验的。”
孙长明悠然道：“你们还在搞rna提取设备用得还习惯不”
杨煦冷漠：“挺好的，不劳孙教授费心。”
孙长明嘿嘿一笑：“老杨啊，其实我今天过来是想说，我们研究所那边，消化道肿瘤的rna提取纯化，刚刚取得了重大突破。”
此话一出，实验室里的眾人都抬起了头。
孙长明：“大家都知道，消化液和血清里的rna极其容易降解，我们团队花了一个月的时间，反覆调整试剂配比，终於摸索出了一套极限纯化的办法。”
王晓晴好奇道：“噢说来听听。
孙长明坐直了身体，开始长篇大论：“最重要的就是放弃传统的trizol，我们採用了硅胶膜离心柱法结合多重酶解，首先，在裂解阶段加入高浓度的蛋白酶k，56度水浴消化一个小时，然后，利用离心柱进行过柱，为了洗掉多糖杂质，我们专门配製了一种含高浓度盐酸胍和异丙醇的洗脱液，反覆洗脱三次。”
“虽然这个流程耗时要四个多小时，成本也高，但纯度那是没得说，a260/280的比值，我们稳定做到了1.75以上！这在当前的液体活检领域，绝对是领先水平！”
说完，孙长明往椅背上一靠，端起桌上的水杯喝了一口，等待著惊嘆声。
1.75的纯度，在08年，確实值得骄傲。
然而，实验室里眾人的表情都怪怪的。
大家面面相覷，好像不知道该说什么好。
孙长明皱了皱眉：“怎么没听懂也是，这套酶解过柱的体系確实复杂了点，你们刚接触湿实验，慢慢来————”
“不是，孙教授。”陈浩默默地举起了手，“我有个问题。”
“你说。”孙长明点点头。
陈浩语气真诚地发问：“既然是要解决蛋白污染和降解的问题，为什么一定要用蛋白酶k去水浴消化一个小时，还要花那么高成本去买离心柱反覆洗脱呢”
孙长明愣了一下：“不用这些，你怎么去蛋白怎么提纯”
陈浩理所当然地回答：“双重氯仿抽提，加糖原共沉淀啊，我们老大提出来的这个方法，牺牲点第一次的上清液体积，再加一次氯仿离心，蛋白就全沉下去了，然后补5微升糖原把rna析出来，整个流程下来四十分钟就搞定了，效果很好呀，为什么要搞得像你那么复杂”
孙长明：“”
反应了半天后，孙长明抗拒道：“不对，氯仿確实能去蛋白，但你抽提两次，水相里的rna早就流失得七七八八了，就算加了糖原，浓度也绝对达不到下游要求，纯度就更別提了，能过1.5都算你们运气好。”
“可是————”蔡卓群在旁边忍不住插嘴。
“没什么可是的，科研需要的是严谨，你们用这种糙办法，跑出来的数据全都是假阳性或者直接假阴性。”
就在这时，很巧嗷。
离心机跑的新一批內容出来了。
陈浩道：“孙教授，数据是不是真的，测一下就知道了。”
蔡卓群立刻上前，打开离心机盖，加入无酶水，溶解。
nanodrop分光光度计前。
1微升的样本滴入基座。
测量！
屏幕刷新，一排数据跳了出来。
浓度：14.5ng/ul。
a260/280：1.95。
a260/230：2.03。
孙长明：“啊”
1.8到2.0是rna纯度的完美区间。
他引以为傲、耗时四小时、加了各种昂贵试剂才跑出的1.75。
可这个呢
1.95是什么鬼啊！
“换一管，再测。”孙长明不信邪。
蔡卓群依言换了第二个样本。
浓度：13.8ng/ul。a260/280：1.92。
第三管。
浓度：15.1ng/ul。a260/280：1.96。
极其稳定的高纯度，完美的数据重现性，没有任何悬念的绝对碾压。
孙长明，不嘻嘻。
陈浩在旁边补了一刀：“孙教授，你看，四十分钟提出来的，效果是不是比你那个好多了”
杨煦绷不住了，哈哈大笑：“老孙啊，你那个蛋白酶k水浴一小时的方法，確实挺有创意的，就是费时费力还费钱，没关係，坚持你的想法，相信你一定行！”
孙长明沉默半天，最后也客气的笑道：“嗯————数据还算凑合吧，不过，不同组织的样本特性不一样，你们这套方法在血清上管用，在我们消化道黏液样本上，未必適用，科研嘛，就是要在不同的方向上多做尝试，加油吧。”
“哎呀，想起来了，我培养箱里的那些细胞还没换液呢，今天就不跟你们多聊了，走了啊。”
他说完，便朝门口走去。
轻轻的他走了，正如他轻轻的来，挥一挥衣袖，不带走一丝云彩
出门。
孙长明伸手捂住胸口，喘不上气。
呃啊，难受啊！
“双重氯仿————糖原————”
孙长明一边扶著墙往研究所走，一边在嘴里反覆念叨著这几个词。
“妈的，这小子到底怎么想出来的这哪来的方法我什么时候能跟他一起做实验”
孙教授试图依赖江河。
要不把项目组解散算了，打不过就加入吧
王教授不都加入学生团队了吗，我就不行
嗯————现在还来得及吗
有没有什么优雅的投靠姿势在线等，挺急的。