第229章 100%(六更,求月票!)(2/2)
“异丙醇沉淀,负20度静置二十分钟。”
二十分钟后,再次离心。
倒掉上清液,管底出现了一个微小的白色沉淀团块。
“洗涤。”
加入75乙醇,温和洗涤,离心,弃液。
“风干,加无酶水溶解。”
整个提取过程耗时将近两个小时。
第一批五个样本的rna提取完成。
江河拿着溶解后的样本,走到nanodrop分光光度计前。
滴入1微升样本,放下检测臂。
所有人都围了过来。
屏幕上跳出数据:
浓度:15ng/ul。
a260/280:195。
a260/230:203。
极度纯净的数据。
经历了跨国运输和反复冻融,他们依然靠这套提取工艺拿到了完美的样本。
“提取成功。”江河淡淡地说了一句,“按这个标准,把剩下的样本全部提出来,王教授,准备逆转录。”
“收到。”王晓晴立刻接过样本,走向另一边的操作。
逆转录过程相对自动化。
利用特定的茎环引物,将极其微量的irna逆转录成a。
时间一分一秒地过去。
窗外的天色逐渐暗了下来。
没有人提议吃饭。
所有人,接力完成每一个步骤。
晚上八点。
五十份样本的a全部准备就绪。
最关键的一步到来了。
“准备上qpcr机。”江河说。
易向晚和顾亦舟将配制好的pcr反应体系小心翼翼地加入96孔板中。
每一个孔里,都包含着引物、荧光染料、a模板和酶。
这套体系,是他们之前在1万倍稀释的极端低浓度下拉出来的。
江河拿起96孔板,放入qpcr仪的反应槽中。
压下盖子。
输入参数。
设定循环程序。
“开始运行。”
机器启动。
检测过程需要两个小时。
这两个小时,对实验室里的每一个人来说,都如同世纪般漫长。
如果扩增曲线是一条平滑的直线,没有起伏,说明患者在两三年前的血液中,并没有这些特异性irna的异常表达。
那就意味着,早筛模型失败。
如果曲线能漂亮地拉起来,并且ct值(循环阈值)在有效范围内,则证明模型成立。
江河拉过一把椅子,坐在电脑前。
他不说话,其他人也不敢说话。
易向晚在操作边走来走去。
“你别晃了。”顾亦舟烦躁地说。
“我紧张啊师兄,万一……我是说万一,欧洲那边的血清变质了怎么办?或者我们找的那些标志物其实在极早期根本不释放?”
“闭嘴。”所有人一起打断了他。
易向晚赶忙举手:“抱歉!”
第一阶段的变性、退火、延伸循环结束。
屏幕上依然是一片空白。
“怎么还没出线?”陆晓林手心已经出汗了。
蔡卓群沉声说道:“急什么,极早期的样本,浓度低,ct值肯定靠后。”
第三十个循环。
依然没有明显起伏。
第三十二个循环。
突然。
屏幕的坐标轴上,第一条曲线的尾部,出现了一个上扬角度。
所有人屏息。
第三十三个循环。
上扬的角度开始变大。
紧接着,第二条、第三条、第五条曲线……
第三十五个循环。
屏幕上爆发出密集的扩增曲线!
一条条平滑的对数扩增曲线,拔地而起!
没有任何杂乱的非特异性扩增!
而在另一侧的熔解曲线界面上,更是拉出了漂亮整齐的单峰!
“卧槽……”
易向晚直接爆了一句粗口。
王晓晴呼吸也急促起来:“内参曲线平稳,不存在加样误差……出来了,江河,和我们之前建立的300组健康基线相比,50份样本的特征irna全部呈显著高表达!”
陈浩倒吸凉气。
陆晓林和蔡卓群对视了一眼。
五十份极早期胰腺癌血清,五十个隐藏在健康下的种子。
这意味着,他们在零八年,把癌中之王在血液中揪了出来。
这项成果,可以将癌症的发现时间,整整提前两到三年!
江河依然坐在椅子上,脑海中的进度条跳动。
【irna胰腺癌早筛项目进度:100】
完成了这一步。
这直接完成了后续的百分之五十。
前世他查阅了无数文献,在实验室里熬了无数个日夜,一万次失败才换来一次稳定读数的执念。今生从盲缝开始,一步步积累资金,招揽团队……
这一切,终于结出果实。
他闭上眼睛。
沈钰的面容在眼前闪过。
“江医生,你回来啦,我有话想跟你说……”
江河咬牙。
这一次,不会再让你说出那句话,我保证。
“老大!!!”
易向晚猛地冲上来,从后面抱住江河:“我们成功了!!卧槽!牛逼啊!老大我们真的成功了!”顾亦舟也冲了过来,怒吼道:“牛逼!牛逼!”
所有人都围了上来。
“我们成功了!”
“完美的数据啊!!!”
“拿下!拿下!”
“老大,你太神了!这系统绝了!”
程溪瑶和唐培两个女生眼泪都干出来了。
连一向稳重的王晓晴教授,此刻也激动得不知道该说什么。
实验室里彻底沸腾。
大家疯了一样地庆祝,互相拥抱,拍打。
江河被他们摇晃得几乎坐不稳。
任由他们发泄着情绪,嘴角终于扬起一抹笑意。
他伸手往下压了压。
实验室里稍微安静了一些,所有人都目光灼灼地盯着他。
江河整理了一下白大褂,语气平静地说道:
“数据封存,整理报告。”
“兄弟们,是时候一起去巴尔的摩玩玩了。”